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IRMM-355 糞腸球菌 (CIP 106877)標(biāo)準(zhǔn)品樣品的描述每個小瓶包含一個糞腸球菌的物質(zhì)球體(CIP 106877)

IRMM-355 糞腸球菌 (CIP 106877)分別用于根據(jù)ISO 7218[1]和ISO 7899-2[2]，在馬血瓊脂或斯蘭內(nèi)茨和巴特利瓊脂上菌落計(jì)數(shù)測定糞腸球菌。該制劑中的細(xì)菌細(xì)胞在室溫下不能存活。因此，在分析過程中，從冰箱中逐個拿出小瓶。在所有步驟中都要使用無菌耗材，并在無菌條件下工作。

馬血瓊脂（標(biāo)準(zhǔn)電鍍）

1。每個材料球使用10個適當(dāng)條件的介質(zhì)板。

2.通過無菌地去除塞子，打開含有材料球體的小瓶。

3.向小瓶中加入1 mL的氯化鈉水溶液(質(zhì)量濃度為0.9 g/L)。等待30秒，通過上下移液來均勻化。

4.通過將9份100μL和10個瓊脂平板上，確保盡可能從小瓶中除去液體。

5.使用一個一次性無菌撒布機(jī)(無玻璃撒布機(jī)）將溶解的材料均勻地?cái)備佋诎灞砻妫苊獍宓倪吘墶?/p>

6.在最后一個板的瓊脂表面上輕輕上下移動其上的末端5次，以幫助去除其上的任何剩余液體。

7.在室溫下干燥盤子30分鐘，然后再倒置。

8.在37°C±1°C下孵育14小時至24小時。

Slanetz和Bartley瓊脂（膜過濾）

1。每個材料球使用20個適當(dāng)條件的介質(zhì)板。

2.通過無菌地去除塞子，打開含有材料球體的小瓶。

3.向小瓶中加入1 mL的氯化鈉水溶液(質(zhì)量濃度為0.9 g/L)。等待30秒，通過上下移液來均勻化。

4.確保將19份50μL和一部分含有剩余溶液的液體分配到20個獵.鷹管上，每個管中含有10 mL的氯化鈉水溶液(質(zhì)量濃度為0.9g/L)。

5.使用帶有真空歧管的膜過濾裝置在每個Falcon管中過濾溶液，并使用包含47 mm膜(孔徑0.45μm)的過濾漏斗：

5a。將溶液倒在過濾器上，吸出

5b。激活吸力以除去溶液

5c。用10 mL的氯化鈉(質(zhì)量濃度為0.9 g/L)水溶液沖洗Falcon管，關(guān)閉吸力后倒入過濾器。

5d.激活吸力，取出溶液

5e。重復(fù)沖洗（共清洗2次）

6.用無菌鑷子把過濾器放在瓊脂平板上。

7.在室溫下放置盤子30分鐘，然后再翻轉(zhuǎn)。

8.在36°C±2°C下孵育40小時至44小時。

存儲

IRMM-355 糞腸球菌 (CIP 106877)標(biāo)準(zhǔn)品瓶應(yīng)立即使用，也可以存儲在-20°C或-70°C。如果儲存在-20°C下，應(yīng)避免稍后的溫度轉(zhuǎn)移回-70°C，因?yàn)槲覀儗﹄S后的儲存溫度變化對細(xì)菌細(xì)胞活力和恢復(fù)的影響知之甚少。然而，歐盟委員會不能對在客戶的場所儲存材料期間發(fā)生的變化負(fù)責(zé)，特別是對打開的樣品。