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1. 預(yù)期用途

流感抗血清試劑 01/452 在綿羊中制備，用于 A/Panama/2007/99 抗原的單徑向擴(kuò)散測定。

2. 注意

NIBSC 01/452,流感抗 A（標(biāo)準(zhǔn)品）不適用于人類食物鏈中的人類或動(dòng)物。

該材料不是人或牛來源。與所有生物來源的材料一樣，這種制劑應(yīng)被視為對健康有潛在危害。應(yīng)根據(jù)您自己實(shí)驗(yàn)室的安全程序使用和丟棄它。此類安全程序應(yīng)包括戴防護(hù)手套和避免產(chǎn)生氣溶膠。打開安瓿或小瓶時(shí)應(yīng)小心謹(jǐn)慎，以免割傷。

3. 單元

沒有為該材料分配單元。

4. 內(nèi)容

生物材料原產(chǎn)國：英國。

在 SHEEP (SH410/411) 中針對 A/Panama/2007/99 病毒的純化 HA 制備抗血清。通過用菠蘿蛋白酶處理從純化的病毒中提取 HA 抗原，并通過在蔗糖梯度上沉淀來純化 (Brand, CN and Skehel, JJ, Nature, New Biology, 1972, 238, 145-147。一劑約 50 微克 HA 與將弗氏完全佐劑 (FCA) 肌肉注射到兩只綿羊的每只中，兩周后給予 10 微克劑量，并以每周間隔再注射兩次。

初次免疫后八周，收集每種血清，加入NaN3（0.05% w/v）并將血清暴露于 tp pH5 兩小時(shí)，以符合 EC 口蹄疫決定。收集血清，用含有NaN3(0.05% w/v) 的 PBS 緩沖液 1:3 稀釋。將血清裝入 2ml 體積的小瓶中。 28瓶測試稱重的平均重量為2.015g，變異系數(shù)為0.41%

試劑 01/452 已在 pH5 中暴露 2 小時(shí)，隨后通過 rt PCR 檢測發(fā)現(xiàn)口蹄疫病毒 (FMDV) 活性為陰性。用于生產(chǎn) 01/452 的兩只羊健康狀況良好，沒有口蹄疫的癥狀

因此，血清試劑 01/452 符合 EC 2001 年 3 月 8 日的決定 (2001/190/EC) 關(guān)于英國 FMDV 的保護(hù)措施。

5. 存儲(chǔ)

NIBSC 01/452,流感抗 A（標(biāo)準(zhǔn)品）

+2-8oC

請注意：由于凍干材料固有的穩(wěn)定性，NIBSC 可能會(huì)在環(huán)境溫度下運(yùn)輸這些材料。

6. 開瓶指南

樣品瓶有一個(gè)“上翻式”圓形瓶蓋。無論是在瓶蓋上還是在小瓶的套環(huán)上，都標(biāo)有撬開瓶蓋的位置。這暴露了塞子的一個(gè)區(qū)域，通過該區(qū)域可以使用皮下注射針頭和注射器進(jìn)行制劑的重構(gòu)和取出。如果首先使用移液器，則使用鑷子等完全取下金屬項(xiàng)圈，戴上合適的手套注意避免割傷。取下塞子以便進(jìn)入。應(yīng)注意防止內(nèi)容物丟失。

7. 材料的使用

不應(yīng)嘗試稱量材料的任何部分。對于 1ml 中含有 20-50 微克 HA 活性的抗原的測定，應(yīng)將大約 8μl 未稀釋的試劑添加到 1ml 瓊脂糖中。 通過將 4μl 試劑添加到 1ml 瓊脂糖中來測定較低濃度的抗原（5-20 微克 HA/ml）。 可能需要根據(jù)當(dāng)?shù)貙?shí)驗(yàn)室條件更改這些抗血清濃度。 在加壓和染色之前用 PBS 清洗凝膠可以提高 SRD 區(qū)域的清晰度抗血清試劑 01/452 應(yīng)按照 Wood, JM, Schild, GC, Newman, RW 和 Seagroatt, VA Jornal of Biological Standarisation, 1977, 5, 237-247 所述的方法使用。