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1. 預(yù)期用途

用于核酸檢測的第一個 HPV 31 型 (HPV31) DNA 國際標(biāo)準(zhǔn)由冷凍干燥的重組質(zhì)粒 pT713 含有通過 nt 位置 3361（位于 E4 基因中）克隆的全長 HPV31 DNA（Lorincz 等人，1986；Eklund 等人，2018 年）。該標(biāo)準(zhǔn)已在純化的人類基因組 DNA 的背景下配制，以 0.5 ml 等分試樣凍干并在 -20 °C 下儲存。該材料在一項涉及 15 個實(shí)驗室的國際合作研究中得到了表征（WHO/BS/2019.2360）。

2. 注意

NIBSC 14/258 人乳頭瘤病毒31型（標(biāo)準(zhǔn)品）不適用于人類或動物人類食物鏈。

該材料含有來自人類胎盤的 DNA (Sigma, D7011)。與所有生物來源的材料一樣，這種制劑應(yīng)被視為對健康有潛在危害。應(yīng)根據(jù)您自己實(shí)驗室的安全程序使用和丟棄它。此類安全程序應(yīng)包括戴防護(hù)手套和避免產(chǎn)生氣溶膠。打開安瓿或小瓶時應(yīng)小心謹(jǐn)慎，以免割傷。

3. 單元

HPV31 DNA 的第一個國際標(biāo)準(zhǔn)（NIBSC 代碼 14/258）的規(guī)定單位為每安瓿 1.6 x 10^7 國際單位 (IU)。

4. 內(nèi)容

生物材料原產(chǎn)國：英國。

每個安瓿含有凍干的 0.5 mL HPV31 質(zhì)粒 DNA，稀釋在 10 mM Tris 緩沖液 pH7.4 中，含有 1 mM EDTA、5 mg/mL 海藻糖和源自胎盤的人 DNA (~1 x 10^6 GEq/mL)。

5. 存儲

收到時，安瓿瓶應(yīng)存放在 -20 °C 或以下。

請注意：由于凍干材料固有的穩(wěn)定性，NIBSC 可能會在環(huán)境溫度下運(yùn)輸這些材料。

NIBSC 14/258 人乳頭瘤病毒31型（標(biāo)準(zhǔn)品）

6. 開瓶指南

DIN 安瓿瓶有一個“易開”顏色的壓力點(diǎn)，窄的安瓿桿在此與較寬的安瓿瓶主體相連。各種類型的安瓿破碎機(jī)可商購獲得。要打開安瓿，輕輕敲擊安瓿以收集底部（標(biāo)記）端的材料，并按照安瓿破碎器隨附的制造商說明進(jìn)行操作。

7. 材料的使用

在重新配制之前，不應(yīng)嘗試稱量凍干材料的任何部分

HPV31 DNA 的第一個國際標(biāo)準(zhǔn)包含高拷貝數(shù)模板。打開玻璃安瓿時，通過霧化污染 HPV31 質(zhì)粒 DNA 的風(fēng)險很高。材料必須在單獨(dú)的實(shí)驗室環(huán)境中打開和處理，遠(yuǎn)離其他預(yù)放大組件，例如試劑、實(shí)驗室器具和樣品。

該材料以凍干形式提供，使用前應(yīng)在 0.5 ml 無菌無核酸酶水中復(fù)溶。確保安瓿的內(nèi)表面被添加的水潤濕，以便重組粘附在玻璃上的任何凍干材料顆粒。重組材料的最終濃度為 3.2 x 10^7 IU/mL。重組材料適用于校準(zhǔn)用于擴(kuò)增和檢測 HPV31 DNA (WHO/BS/2019.2360) 的內(nèi)部或工作標(biāo)準(zhǔn)。該材料不得用于校準(zhǔn)或評估提取、沉淀或離心程序。 NIBSC 可以為在提取步驟無法與擴(kuò)增步驟分離的分析中使用 14/258 提供指導(dǎo)（例如進(jìn)樣、應(yīng)答平臺）。該材料尚未針對人類 DNA 核酸擴(kuò)增技術(shù)進(jìn)行校準(zhǔn)。