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1. 預(yù)期用途

已制定上述標(biāo)準(zhǔn)以取代第二版凝血酶國際標(biāo)準(zhǔn) (01/580)。新標(biāo)準(zhǔn)的效力是 90 IU/安瓿。

2. 注意

NIBSC 19/188 凝血酶(WHO國際標(biāo)準(zhǔn)品)不適用于人類食物鏈中的人類或動(dòng)物。

該制劑含有人類來源的材料，最終產(chǎn)品或衍生該制劑的源材料已經(jīng)過測(cè)試，發(fā)現(xiàn) HBsAg、抗 HIV 和 HCV RNA 呈陰性。與所有生物來源的材料，這種制劑應(yīng)被視為對(duì)健康有潛在危害。應(yīng)根據(jù)您自己實(shí)驗(yàn)室的安全程序使用和丟棄它。此類安全程序應(yīng)包括戴防護(hù)手套和避免產(chǎn)生氣溶膠。打開安瓿或小瓶時(shí)應(yīng)小心謹(jǐn)慎，以免割傷。

3. 單元

通過一項(xiàng)由 13 個(gè)國家的 20 個(gè)實(shí)驗(yàn)室組成的國際合作研究，將效力分配給該標(biāo)準(zhǔn)。參與者被要求執(zhí)行他們內(nèi)部的凝血酶效力測(cè)定方法。這些是用纖維蛋白原或血漿底物或顯色方法進(jìn)行的。使用平行線分析相對(duì)于第二國際凝血酶標(biāo)準(zhǔn) (01/580) 計(jì)算候選材料的效力。研究的結(jié)論是候選材料 19/188 是 01/580 的合適替代標(biāo)準(zhǔn)，效力為 90 IU/安瓿。這是基于纖維蛋白原和血漿凝固測(cè)定的結(jié)果。顯色測(cè)定的結(jié)果未用于計(jì)算該值。該標(biāo)準(zhǔn)由世界衛(wèi)生組織生物標(biāo)準(zhǔn)化專家委員會(huì)于 2020 年 8 月制定。

4. 內(nèi)容

生物材料原產(chǎn)國：英國。

用于制備標(biāo)準(zhǔn)的凝血酶由制造商慷慨提供，作為從混合血漿制備的人 α-凝血酶的純化溶液。將材料作為冷凍溶液運(yùn)送至 NIBSC，然后在 10 mM Hepes、pH 7.4、含有 0.15 M NaCl 和 5 mg/ml 人白蛋白溶液的溶液中解凍并稀釋至濃度約為 90 IU/ml。 5 mL DIN 安瓿中裝有 1 mL 等分試樣的稀釋材料，并按照 NIBSC 程序進(jìn)行凍干。共有 9720 個(gè) 19/188 安瓿可供使用。通過在整個(gè)填充過程中均勻分布的檢查砝碼來監(jiān)測(cè)填充精度。結(jié)果表示為 % 變異系數(shù) (cv)，其中 n 是為確定每個(gè)參數(shù)而取樣的安瓿數(shù)量：平均填充重量 = 1.0070 g (cv = 0.14 %, n = 343)；平均干重 = 0.01643 g (cv = 1.16 %, n = 6)；平均殘留水分含量 = 0.49 % (cv = 27.68 %, n 12)；平均氧氣頂空 = 0.43 % (cv = 33.92 %, n = 12)。

凝血酶標(biāo)準(zhǔn)的 α 凝血酶含量尚不清楚，但國際合作研究表明，凝血與顯色活性的比率與之前的第二版凝血酶國際標(biāo)準(zhǔn) (01/580) (1) 非常相似，后者在turn 與第一版 Alpha 凝血酶國際標(biāo)準(zhǔn) (89/588) 非常相似

NIBSC 19/188 凝血酶(WHO國際標(biāo)準(zhǔn)品)

5. 存儲(chǔ)

未開封的安瓿瓶應(yīng)在 -20oC 或以下避光保存。請(qǐng)注意：由于凍干材料固有的穩(wěn)定性，NIBSC 可能會(huì)在環(huán)境溫度下運(yùn)輸這些材料。

6. 開瓶指南

DIN 安瓿瓶有一個(gè)“易開”顏色的壓力點(diǎn)，窄的安瓿桿在此與較寬的安瓿瓶主體相連。各種類型的安瓿破碎機(jī)可商購獲得。要打開安瓿，輕輕敲擊安瓿以收集底部（標(biāo)記）端的材料，并按照安瓿破碎器隨附的制造商說明進(jìn)行操作。

NIBSC 19/188 凝血酶(WHO國際標(biāo)準(zhǔn)品)

7. 材料的使用

在重新配制之前，不應(yīng)嘗試稱量凍干材料的任何部分

復(fù)溶時(shí)，讓安瓿瓶升溫至室溫，并確保凍干材料全部位于安瓿瓶底部，然后小心地從安瓿瓶頂部折斷。內(nèi)容物應(yīng)使用 1 mL 蒸餾水重新溶解并輕輕混合以產(chǎn)生澄清、無色的溶液。該溶液應(yīng)儲(chǔ)存在冰上，并在為您的測(cè)定定義的條件下稀釋到適當(dāng)?shù)臏y(cè)定緩沖液中盡快使用。重構(gòu)后，當(dāng)溶液保持在冰上時(shí)，活性會(huì)穩(wěn)定幾個(gè)小時(shí)。然而，在重構(gòu)溶液進(jìn)一步冷凍和解凍后，不能保證效力。