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1. 預(yù)期用途

英國(guó)中央獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室于 1975 年建立了韋氏梭狀芽孢桿菌（產(chǎn)氣莢膜）β 類(lèi)毒素的國(guó)際參考制劑 [1]。該類(lèi)毒素旨在用于標(biāo)準(zhǔn)化含有該成分的疫苗。韋爾奇梭菌（產(chǎn)氣莢膜梭菌）國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)隨后更名為產(chǎn)氣莢膜梭菌國(guó)際標(biāo)準(zhǔn) [2]。

2. 注意

該制劑不適用于人類(lèi)食物鏈中的人類(lèi)或動(dòng)物。

該材料不是人或牛來(lái)源。與所有生物來(lái)源的材料一樣，這種制劑應(yīng)被視為對(duì)健康有潛在危害。應(yīng)根據(jù)您自己實(shí)驗(yàn)室的安全程序使用和丟棄它。此類(lèi)安全程序應(yīng)包括戴防護(hù)手套和避免產(chǎn)生氣溶膠。打開(kāi)安瓿或小瓶時(shí)應(yīng)小心謹(jǐn)慎，以免割傷。

NIBSC CWBETATD 產(chǎn)氣莢膜梭菌β抗毒素（標(biāo)準(zhǔn)品）

3. 單元

沒(méi)有國(guó)際單位被分配到這個(gè)準(zhǔn)備工作。

4. 內(nèi)容

生物材料原產(chǎn)國(guó)：英國(guó)。

國(guó)際參考制劑由 Cl 培養(yǎng)物制備。 welchii (perfringens) 通過(guò)福爾馬林和過(guò)濾處理。通過(guò)用硫酸銨沉淀來(lái)濃縮類(lèi)毒素。將濃縮的類(lèi)毒素以1.0ml體積分配在安瓿中并在干燥氮?dú)鈿夥罩欣鋬龈稍铩?duì)于 β 類(lèi)毒素，每個(gè)安瓿的干物質(zhì)平均重量確定為 0.0692g ± 0.0038g。

5. 存儲(chǔ)

未開(kāi)封的安瓿瓶應(yīng)儲(chǔ)存在 -20oC。

請(qǐng)注意：由于凍干材料固有的穩(wěn)定性，NIBSC 可能會(huì)在環(huán)境溫度下運(yùn)輸這些材料。

6. 開(kāi)瓶指南

輕輕敲擊安瓿以收集底部（標(biāo)記）端的材料。確保在嘗試打開(kāi)之前，用金剛石或碳化鎢頂端的玻璃刀銼或其他合適的工具在頸部狹窄部分對(duì)安瓿進(jìn)行全面刻痕。將安瓿瓶放入安瓿瓶開(kāi)啟器中，將分?jǐn)?shù)定位在“A”位置；如下圖所示。用布或幾層薄紙圍繞安瓿。握住安瓿瓶和支架并在“B”點(diǎn)擠壓。安瓿瓶會(huì)突然打開(kāi)。注意避免割傷和彈射玻璃碎片進(jìn)入眼睛。注意不要從安瓿瓶中損失任何物質(zhì)，也不要讓玻璃掉入安瓿瓶中。

安瓿開(kāi)啟裝置的側(cè)視圖，其中包含一個(gè)準(zhǔn)備打開(kāi)的安瓿。 “A”是得分標(biāo)記，“B”是施加壓力的點(diǎn)。

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7. 材料的使用

在重新配制之前，不應(yīng)嘗試稱(chēng)量?jī)龈刹牧系娜魏尾糠?/p>

a ）。參考制劑的重構(gòu)

將一安瓿的參比制劑溶解在 1.0ml 蒸餾水中。應(yīng)注意確保整個(gè)安瓿中的內(nèi)容物完全重新懸浮。

b）。參考疫苗的制備

將 18ml 含有足量硫柳汞以確保完整疫苗濃度為 0.01% 的生理鹽水和 5ml 無(wú)菌氫氧化鋁凝膠（2%）充分混合，然后將 2 個(gè)重構(gòu)的參比類(lèi)毒素安瓿的內(nèi)容物加入 23ml稀釋氫氧化鋁，總體積為 25ml。通過(guò)使用巴斯德吸管將一定體積的混合物進(jìn)出安瓿數(shù)次并在每次轉(zhuǎn)移后徹底混合，從而洗掉殘留在安瓿中的痕量類(lèi)毒素。允許疫苗吸附

在室溫下放置三天，間隔搖晃以確保疫苗均勻。

C）。參考疫苗稀釋液的制備

參考疫苗在由 1 份氫氧化鋁凝膠（2%）和 4 份生理鹽水組成的稀釋劑中稀釋。稀釋液分五步制備，即 1/5、1/25、1/125。使用這種稀釋劑可保持恒定百分比的佐劑。每次需要注射材料時(shí)，都應(yīng)新鮮制備初始混合物和稀釋液。

d)。效力測(cè)試

建議每次疫苗稀釋使用不少于十只兔子組。通過(guò)皮下途徑兩次注射2ml體積的疫苗，兩次注射之間的間隔為21-28天。動(dòng)物在第二次注射后 14 天放血，根據(jù)試驗(yàn)設(shè)計(jì)，血清要么作為大量樣品合并，要么合并在幾個(gè)庫(kù)中。

e)。結(jié)果解釋

將類(lèi)毒素確定為國(guó)際參考制劑的測(cè)定結(jié)果表明，使用這種特定的測(cè)定方法，在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部和實(shí)驗(yàn)室之間對(duì)測(cè)試疫苗制劑效力的估計(jì)差異很大。然而發(fā)現(xiàn)，通過(guò)結(jié)合所有的組合在每個(gè)稀釋水平的測(cè)定結(jié)果，可以證明劑量反應(yīng)曲線(xiàn)。 因此，國(guó)際參比制劑在此階段的作用是提供穩(wěn)定的參比制劑以用于檢查測(cè)試系統(tǒng)。