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NIST SRM 2391d 基于PCR 的DNA 分析標(biāo)準(zhǔn)（標(biāo)準(zhǔn)品）主要用于基于聚合酶鏈反應(yīng) (PCR) 的基因檢測(cè)的法醫(yī)和親子鑒定質(zhì)量保證程序的標(biāo)準(zhǔn)化，用于教學(xué)執(zhí)法或非臨床研究目的，以及在以下情況時(shí)用于質(zhì)量保證為內(nèi)部控制材料賦值。它不適用于任何人類或動(dòng)物臨床診斷用途。該 SRM 由兩種形式的充分表征的人類脫氧核糖核酸 (DNA) 組成；基因組 DNA（組分 A 到 D）和從已點(diǎn)到 FTA 紙上的細(xì)胞中提取的 DNA（組分 E）。組件的完整列表包含在表 1 中。一個(gè) SRM 2391d 單元由一個(gè)小瓶組成，每個(gè)小瓶五個(gè)組件中的每一個(gè)都包裝在一個(gè)盒子中。

認(rèn)證值：

NIST 認(rèn)證值是 NIST 對(duì)其準(zhǔn)確性有最高置信度的值，因?yàn)樗幸阎蚩梢傻钠顏碓炊家颜{(diào)查或考慮在內(nèi) [1]。 SRM 2391d 中組件的認(rèn)證值來自毛細(xì)管電泳 (CE) 和下一代基于測(cè)序 (NGS) 的表征允許在基因座處對(duì)短串聯(lián)重復(fù) (STR) 進(jìn)行計(jì)數(shù)和直接測(cè)序。通過使用多個(gè)基于 PCR 的 STR 分型試劑盒和基于 NGS 的試劑盒和技術(shù)建立了高可信度等位基因調(diào)用。 SRM 2391d 中認(rèn)證的 STR 等位基因調(diào)用可追溯至自然單位計(jì)數(shù) 1，通過對(duì) CE 和 NGS 數(shù)據(jù)的分析計(jì)算重復(fù)單元的數(shù)量 [2]。表 2 和表 3 列出了用于表征常染色體 STR 基因座、Y-STR 基因座和 X-STR 基因座的基于 CE 和 NGS 的方法。

儲(chǔ)存：SRM 2391d冷藏在攝氏2度至攝氏8度的溫度范圍內(nèi)(不要冷凍)。

用途：A至D組分的小瓶應(yīng)在開瓶前進(jìn)行短暫的渦流離心。開瓶后，應(yīng)立即取出樣品進(jìn)行分析，并立即進(jìn)行處理，以獲得適用的證明值。成分E，即FTA紙上的細(xì)胞，應(yīng)清洗以減少PCR抑制劑和鹽之前的PCR擴(kuò)增。

資料來源：NIST公司為A~C‘組分制備的人基因組DNA cxtracts是在NIST研究中心批準(zhǔn)下，從單來源匿名獻(xiàn)血者的白血球中提取出來的，此SRM是經(jīng)NIST測(cè)定后研制的。E組分所用的細(xì)胞系是根據(jù)許可證和物質(zhì)轉(zhuǎn)讓協(xié)議從美國型文化收藏公司(Manassas，VA)獲得的。在使用前，所有原料均被檢測(cè)為HBsAg、HIV、HCV和HIV-1AG陰性。

信息值：

NIST 信息值是 NIST SRM 2391d 基于PCR 的DNA 分析標(biāo)準(zhǔn)（標(biāo)準(zhǔn)品）用戶可能感興趣和使用的數(shù)據(jù)，但沒有足夠的信息來評(píng)估分配的最高置信度 [1]。信息值已分配給組分 A 到 D 的 DNA 濃度（表 1）、組分 E 的每個(gè)紙沖孔的細(xì)胞數(shù)（表 1）和五種的基因型/單倍型（僅使用 CE 方法分型時(shí)） 13 個(gè)常染色體 STR 基因座（表 7）、3 個(gè) Y-STR 基因座（表 8）、5 個(gè) X-STR 基因座（表 9）、30 個(gè)插入和缺失（Indel）基因座（表 10）和 20 個(gè)插入和空等位基因的成分(INNUL) 基因座 (表 11)。信息值還分配給 101 個(gè)常染色體同一性單核苷酸多態(tài)性 (SNP) 基因座、34 個(gè) Y-SNP 基因座、188 個(gè)常染色體祖先和表型 SNP 基因座，以及通過測(cè)序確定的全線粒體基因組 DNA (mtDNA) 序列